我科室现引进Navios流式细胞仪,它是由美国库尔特公司生产的目前最高端的流式细胞仪,见下图:
Navios的流式细胞分析仪与先进的光学设计结合提高灵敏度和信号分辨率,可用于多色检测和高速数据采集。它具有三种前向角散射光(FS)检测方式,不仅可以检测常规的白细胞,血小板等,最小可区分0.1μm和0.3μm的颗粒;仪器内部温度控制功能,保证样本运行时不受外界干扰,实现最准确的样本检测。它还拥有稳定耐用的卡槽式设计固体激光器,配置3根激光都是由软件进行控制,延长使用寿命。Navios流式细胞分析系统可同时检测10色荧光,用户通过选择合适的单克隆抗体,可轻松完成复杂细胞群的分析。下面我们来了解一下流式细胞仪及其技术的临床应用,如何更好的帮助临床做出诊断和辅助治疗。
流式细胞分析技术
流式细胞分析技术(flowcytometry,FCM)又称流式细胞术,是20世纪70年代发展起来的一种快速的检测技术,它能在功能水平上对单细胞或其余生物颗粒进行定量或定性的分析,在极短的时间内高速分析上万个甚至是几十万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数。
它集电子技术,计算机技术,激光技术,免疫单抗技术以及流体理论于一体,为生物医学与临床检验学发展提供了一个全新的视角和强有力的手段。目前,该技术已经广泛用于临床应用与基础研究,在免疫学、遗传学、血液学、肿瘤学、细胞生物学、细胞遗传学、生物化学等学科领域内发挥着重要的作用。
淋巴细胞亚群及临床意义
T、B淋巴细胞亚群是重要的免疫状态检测指标,在肿瘤、免疫缺陷、病毒感染,自身免疫性疾病、创伤、急性感染、多脏器功能衰竭、器官移植等具有临床诊断、病情判断、诊疗等价值。(T淋巴细胞与细胞免疫有关、B淋巴细胞与体液免疫有关),然而因在血涂片中不同的淋巴细胞尤其是T淋巴细胞之间很难从形态上完全区别,为了检测不同淋巴细胞亚群在淋巴细胞的比例,我们通过使用流式细胞术检测其表面表达的CD分子来得出结果。如T淋巴细胞CD3+,B淋巴细胞CD19+,NK细胞CD16+CD56+。而T淋巴细胞中包含辅助/诱导T淋巴细胞CD3+CD4+、抑制/细胞毒T淋巴细胞CD3+CD8+。如下图:
项目名称
标志抗体
描述
功能
T淋巴细胞
CD3+
总T淋巴细胞
CD3+CD4+
辅助性/诱导性T细胞(Th/Ti)
辅助和诱导细胞免疫和体液免疫
CD3+CD8+
抑制性/杀伤性T细胞(Ts/Tc)
抑制免疫反应/杀伤异源细胞
B淋巴细胞
CD3-CD19+
NK细胞
CD3-CD(16+56)+
自然杀伤细胞
外周血淋巴细胞亚群的临床意义一、T淋巴细胞亚群(CD3+/CD4+/CD8+)
1、CD3+T淋巴细胞增高见于某些自身免疫性疾病(如SLE)、重症肌无力、慢性活动性肝炎。CD3+细胞数减低,见于某些白血病、先天性细胞免疫缺陷、艾滋病、多发性骨髓瘤、传染性单核细胞增多症等。
2、CD4+T细胞下降,常见于某些病毒感染性疾病,如艾滋病、巨细胞病毒感染、严重创伤、应用免疫抑制剂(如环保霉素A)等,而类风湿关节炎活动期CD4+T细胞则升高。
3、CD8+T细胞下降,常见于类风湿性关节炎、干燥综合征、重症肌无力等,而传染性单核细胞增多症急性期、慢性乙型肝炎CD8+T细胞常升高。
4、CD4+/CD8+细胞比值下降,常见于艾滋病、恶性肿瘤复发时,也见于部分传染性疾病,如传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染等;CD4+/CD8+细胞比值升高,常见于类风湿关节炎活动期、系统性红斑狼疮、干燥综合征等。
二、B细胞(CD19+)
1、CD19+升高多见于慢性细菌感染、自身免疫性疾病慢性肝病或慢性B淋巴细胞增生性疾病。
2、CD19+下降主要见于原发性B细胞缺陷,严重联合型免疫缺陷。
三、NK细胞(CD16+/CD56+)
1、CD16+CD56+增高常见于某些病毒感染早期、长期使用干扰素以及习惯性流产等。2、CD16+CD56+降低常见于恶性肿瘤、免疫缺陷病等。
肺泡灌洗液中淋巴表型测定意义疾病
CD3
CD4
CD8
CD4/CD8
结节病
明显增多
明显增多
明显下降
升高
特发性肺间质纤维化(IPF)
显著降低
显著增多
明显降低
肺部肿瘤
数目无明显增多
下降
肺结核
正常
HLA-B27检测及其临床意义
HLA-B27是MHCI类抗原,在有核细胞上广泛表达,其表达与强直性脊柱炎高度相关,在其它血清阴性骨关节病也有明显表达。
1、强直性脊柱炎:HLA-B27阳性率超过90%。
2、Reiter’s综和症:HLA-B27阳性率为70-90%。
3、银屑病性关节炎:HLA-B27阳性率为50-70%。
4、葡萄膜炎:HLA-B27阳性率为40-50%。
注意事项:
采集时间:正常工作日上午(节假日除外)。
检测时间:每周一、三、五。
取报告时间:周二、四、六上午。
注:1、血液中不可以有凝块。
2、标本稳定时间较短,采集后尽快送检。
如有疑问请致电-.
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